人CTGF定量EIA試劑盒使用說明

更新時間：2009-12-23 | 點擊率：3255

人CTGF定量EIA試劑盒使用說明

原理

本實驗采用雙抗體夾心ABC-EIASA法。用抗人CTGF單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的CTGF與單抗結合，加入生物素化的抗人CTGF，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入酶底物TMB，出現藍色，加終止液硫酸，顏色變黃，在450nm處測OD值，CTGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中的CTGF濃度。

試劑盒組成

1． 96孔微孔板：一塊，已包被抗人CTGF單抗。

2．樣品稀釋液：一瓶

3． *抗體工作液：一瓶

4．酶標抗體工作液：一瓶

5．底物稀釋液：兩瓶

6．終止液：一瓶

7．洗滌液（20X）：一瓶

8．標準品（凍干粉，2000ng/ml ）：一管

9．坐標紙：一張

準備試劑與收集血樣

1．洗滌液：用重蒸水1：20稀釋。

2．收集血液標本：采集血清或培養液盡早檢測，2-8℃保存一天；需更長時間須冷凍（-20℃）保存，避免反復凍融。

3．標準品液配制：使用前每管中加入100ul蒸餾水溶解后即可。

4．底物工作液配制：使用前將OPD片放入底物稀釋液中溶解，每片加液5ml。

檢測程序

1．建立標準曲線：設標準孔8孔，每孔中各加入樣品稀釋液100ul，*孔加標準品100ul，混勻后用加樣器吸出100ul，移至第二孔。如此反復作倍比稀釋至第七孔，后，從第七孔中吸出100ul棄去，使之體積均為100ul。第八孔為空白對照。

2．加樣：待測品孔每孔各加入待測樣品100ul。

3．將反應板充分混勻后置37℃ 120分鐘。

4．洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4－6次，向濾紙上印干。

5．除空白孔外，每孔中加入*抗體工作液50ul。

6．將反應板置37℃ 60分鐘。

7．洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4－6次，向濾紙上印干。

8．除空白孔外，每孔加酶標抗體工作液100ul。

9．將反應板置37℃ 60分鐘。

10．洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4－6次，向濾紙上印干

11．每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應5－15分鐘（視顏色深淺靈活掌握）。

12．每孔加入50ul終止液混勻。

13．在450nm處測吸光值。

結果計算與判斷

1．所有OD值都應減除空白值后再行計算。

2．以標準品1000、500、250、125、62、31.25、15.63、0ng/ml之OD值在半對數紙上作圖，畫出標準曲線。

3．根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應CTGF含量。

注意事項

1．本試劑盒宜置-20℃冰箱保存。

2．本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用，溶液應輕輕搖勻后使用。

3．本試劑盒含2M硫酸，不要將它與含疊氮鈉的廢物混在一起。

4．板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。

上一篇：人腮腺炎抗體IgG ELISA 檢測試劑盒

下一篇： ELISA KIT組成及試劑配制

聯
系
我
們

久久涩-久久色综合网-久久色在线播放-久久色影院-在线播放免费视频-在线播放美天传媒tm0065

人CTGF定量EIA試劑盒使用說明