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植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)試劑盒 說明 技術文章

更新時間:2019-06-12  |  點擊率:3739

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植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)試劑盒

商品貨號:QS3401
英文名稱:α-amylase Assay Kit
別名:植物α-淀粉酶(α-AL)活性檢測試劑盒
檢測方法:常量法

 

商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價選擇規(guī)格
QS3401-50管/24樣索橋生物50管/24樣¥250.00元 

 

產(chǎn)品詳細介紹

 

測定意義:

淀粉酶負責水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。

測定原理:

還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質。β-淀粉酶不耐熱,在70℃鈍化15min,從而測定α-淀粉酶活性。

 

產(chǎn)品說明書

貨號:QS3401                規(guī)格:50 管/24 樣

 

植物 α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒說明書 可見分光光度法

 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

淀粉酶負責水解淀粉,包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶。α -淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機地作 用于淀粉中的 α -1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉 的粘度降低,因此又稱為液化酶。

測定原理:

還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質。β -淀粉酶不耐熱,在 70℃鈍化 15min, 從而測定 α -淀粉酶活性。

自備實驗用品及儀器:

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:25mL×1 瓶,常溫保存,若有黃色晶體析出,需 90℃加熱溶解后再用;

試劑二:20mL×1 瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需 70℃加熱溶解后再用。

粗酶液提取:

組織:稱取 0.1~0.2g 樣本(建議稱取約 0.1g 樣本),加 1 mL 蒸餾水勻漿;將勻漿倒入離 心管中,在室溫下放置提取 15min,每隔 5min 振蕩 1 次,使其充分提取;3000g,25℃離心 10min, 吸取上清液并且加蒸餾水定容至 10 mL,搖勻,即為淀粉酶原液。

血清(漿):直接檢測。

操作步驟和加樣表(在 1.5mLEP 管中依次加入下列試劑):

1、 分光光度計預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 試劑一或試劑二 40℃預熱 10min

3、測定步驟 

試劑(μ L)  對照管測定管 
α -淀粉酶原液 250250
70℃水浴 15min 左右,冷卻
蒸餾水250 
試劑二 250
在 40℃恒溫水浴中準確保溫 5min
試劑一500500

   混勻,95℃水浴 5min,冷卻, 540nm 處讀取對照管和測定管吸光度,計算 Δ A=A 測定管-A 對照管。

α-淀粉酶活性計算:

1、標準條件下測定回歸曲線為 y=3.7215x -0.1778; x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值。

2、α -淀粉酶活性

(1)按照樣本質量計算

單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個酶活力單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=[(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣 總)÷T=1.075×(Δ A+0.1778)÷W

(2)按照蛋白質含量計算

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個酶活性單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr) ÷T=0.1075×(Δ A+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(漿)樣本中 α -淀粉酶活性計算

單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個酶活性單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷V 樣÷T=0.1075×(Δ A+ 0.1778)

V 反總:反應體系總體積,0.5mL;V 樣:加入反應體系中樣本體積,0.25 mL;V 樣總:提取 液總體積,10 mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,5min。

 

淀粉系列   價格 
QS3400 淀粉含量測試盒可見分光光度法50管/48樣260
MS3400 淀粉含量測試盒微量法100管/96樣500
QS3401α-淀粉酶測試盒可見分光光度法50管/24樣250
MS3401α-淀粉酶測試盒微量法100管/48樣480
QS3402β-淀粉酶測試盒可見分光光度法50管/24樣460
MS3402β-淀粉酶測試盒微量法100管/48樣900
QS3403-50ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法50管/48樣2300
QS3403-25ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法25管/24樣1600
MS3403ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法100管/96樣4400
QS3404-50可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3404-25可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3404可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS3405-50結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3405-25結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3405結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS3406淀粉分支酶(SBE)測試盒可見分光光度法50管/24樣850
MS3406淀粉分支酶(SBE)測試盒微量法100管/48樣1600

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